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edgeR中怎么實現(xiàn)兩組間差異分析操作,很多新手對此不是很清楚,為了幫助大家解決這個難題,下面小編將為大家詳細講解,有這方面需求的人可以來學(xué)習(xí)下,希望你能有所收獲。
需要讀取基因在所有樣本中的表達量文件,示例如下
gene_id ctrl-1 ctrl-2 ctrl-3 case-1 case-2 case-3 geneA 14 0 11 4 0 12 geneB 125 401 442 175 59 200
每一行為一個基因,每一列代表一個樣本。讀取數(shù)據(jù)的代碼如下
# 讀取表達量的表格 counts <- read.table( "gene.counts.tsv", header=T, sep="\t", row.names=1, comment.char="", check.names=F) # 設(shè)置樣本分組 groups <- factor(c(1,1,1,2,2,2)) # 構(gòu)建edgeR中的對象 y <- DGEList(counts=count,group=group)
根據(jù)CPM
表達量對基因進行過濾,代碼如下
keep <- rowSums(cpm(y)>1) >= 2 y <- y[keep, , keep.lib.sizes=FALSE]
默認采用TMM
歸一化算法,計算每個樣本的 sizefactor, 代碼如下
y <- calcNormFactors(y)
代碼如下
design <- model.matrix(~group) y <- estimateDisp(y,design) et <- exactTest(y)
將差異分析的結(jié)果保存到文件中,代碼如下
res <- et$table write.table(res, "edgeR.xls", header = T, col.names = NA, sep = "\t" )
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